Ови бафери могу се користити за биолошке примјене при неутралном пХ
Три пКа вредности за фосфорну киселину (из Приручника хемије и физике ЦРЦ-а) су 2.16, 7.21 и 12.32. Моносодијум-фосфат и његова коњугирана база, динатријум-фосфат се обично користе за стварање бафера пХ вредности око 7, за биолошке примјене, као што је приказано овде.
Израда овог пуфера је мало теже него прављење ТАЕ и ТБЕ бафера. Међутим, није изузетно тешко. Једноставно просечно. Требало би да потраје око 10 минута да се избаци овај пуфер. Ево како.
1. Одлучите о карактеристикама Буффера
Пре него што направите пуфер, прво знајте која моларност желите, какав ће волумен бити и који је жељени пХ. Већина пуфера најбоље функционишу у концентрацијама између 0.1 М и 10 М. пХ мора бити у оквиру 1 пХ јединице базне киселине / коњугата пКа. За једноставност, овај узорак ће бити за 1 литар пуфера.
2. Утврђивање односа киселине са базом
Користите једначину Хендерсон-Хасселбалцх (доле) да бисте утврдили који однос киселина и базе је потребан да бисте направили пуфер од жељеног пХ-а. Користите вредност пКа која је најближа жељеној пХ вредности, а однос ће се односити на коњугатни пар киселине, који одговара оном пКа.
ХХ Једначина: пХ = пКа + лог ([База] / [киселина])
За пуфер са пХ 6,9, [База] / [киселине] = 0,4898
Замена за [Ацид] и Солве фор [Басе]
Жељени молар пуфера је сума [киселине] + [База].
За 1 М пуфер, [Басе] + [Ацид] = 1 и [Басе] = 1 - [Ацид]
Замењујући ово у односу једначине, из корака 2 добијате:
[Киселина] = 0,6712 мол / Л
Решите за [киселину]
Користећи једначину: [Басе] = 1 - [Ацид], можете израчунати да:
[База] = 0,3288 мол / Л
3. Мешајте киселину и коњугатну базу
Након што сте користили Хендерсон-Хасселбалцх једначину да бисте израчунали који однос киселине и базе је потребан за ваш пуфер, припремите само испод 1 литра раствора користећи тачне количине мононатријум-фосфата и динатријум-фосфата.
4. Проверите пХ
Користите пХ сонду да бисте потврдили да се достигне тачан пХ за пуфер. Прилагодите мало по потреби, користећи фосфорну киселину или натријум хидроксид (НаОХ).
5. Исправите количину
Када се достигне жељени пХ, доведите запремину пуфера на 1 литар. Затим разблажите пуфер по жељи. Овај исти бафер може бити разблажен да би се створили пуфери од 0.5 М, 0.1 М, 0.05 М или било чега између.
6. Савети за Буффер
Запамтите да се пКа не може лако мјерити до тачне вриједности. Неколико различите вредности могу бити доступне у литератури из различитих извора.
7. Шта ти треба
Да бисте направили пуфер, требају вам три супстанце, док су остали материјали опрема. Супстанце су моносодијум-фосфат, динатријум-фосфат и фосфорна киселина или натријум-хидроксид, како би се прилагодио пХ.
Такође ће вам требати пХ метар и сонда и одговарајући лабваре. Ово укључује волуметријску бушилицу, завршне цилиндре, чаше и мешалице.
На крају, требаће вам грејна плоча за мешање.