Основе кулиса за сушење смрзавања (лиофилизација)
Лиофилизација, позната и као замрзавање, је поступак који се користи за очување биолошког материјала уклањањем воде из узорка, што подразумева прво замрзавање узорка и сушење под вакуумом при веома ниским температурама. Лиофилизовани узорци се могу чувати много дуже од необрађених узорака.
Зашто се користи лиофилизација
Лиофилизација или сушење бактерија бактеријом стабилизује културу за дуготрајно чување док се минимизира оштећења која могу бити узрокована строго сушењем узорка.
Многи микроорганизми добро преживљавају када се лиофилизују и могу се лако рехидрирати и гајити у медијима за културу, након дужег временског периода складиштења.
Лиофилизација се такође користи у биотехнолошким и биомедицинским индустријама ради очувања вакцина, узорака крви, пречишћених протеина и других биолошких материјала.
Ова кратка лабораторијска процедура може се користити са било којим комерцијално доступним замрзивачем за чување ваше колекције.
Процес лиофилизације
Процес лиофилизације је заправо апликација физичког феномена званог сублимација: транзиција супстанце са чврстог у гасовито стање, без прве пролазе кроз течну фазу. Током лиофилизације, вода у замрзнутом узорку се уклања као водена пара, без претходног одмрзавања узорка.
Заједничке грешке
Једна од најчешћих грешака када је у питању лиофилизација није познавање тачке топљења узорка, што отежава избор тјелесног лиофилизатора.
Ваши узорци се могу растопити током процеса. Још једна уобичајена грешка је размишљање о томе да је хладније када се сушење смрзава на сушилици за замрзавање. Током примарног сушења, потребно је подесити температуру полица испод тачке евтектика узорка. Требало би да постоји довољно топлоте за подстицање молекула узорка да се креће - али спречите топљење.
Трећа грешка користи погрешну опрему за ваше узорке. Пошто су сушари за замрзавање коришћени у групној поставци, требало би да знате следеће пре него што их купите:
- Колико влаге ће бити лиофилизовано
- Оно што је узорак (и еутектичка температура)
- Како правилно користити сушач за замрзавање
Ако се јединица не користи исправно, она би могла уништити све узорке. Што нас доводи до друге честе грешке: Не одржавање вакуум пумпе. Пумпа мора бити у изврсном радном стању ради лиофилизације. Рад пумпе са баластом за гас отворен 30 минута пре и после процеса сушења са замрзавањем повећава животни век пумпе. Отварање баласта за гас очисти контаминанте из пумпе како би се спречило оштећење унутрашњих компоненти. Често треба провјерити уље пумпе за промјену боје и честице и промијенити уље по потреби. Редовне промене уља одржавају пумпу на оптималном вакууму током процеса сушења са замрзавањем.
На крају, имати погрешну замрзнуту додатну опрему за лиофилизацију, такође је велика грешка. Да ли вам је потребан узорак затварача испод вакуума? Затим је потребна комора за заустављање. Да ли се смрзавате у боцама? Онда будите сигурни да имате комору за сушење са лукама.
Избјегавањем горе наведених грешака, можете осигурати бољу негу вашег сушача за лијевање и пумпу и имати боље узорке када се заврши сушење са замрзавањем.
Референце
Лабцонцо Невс. "Топ 5 грешке направљене у процесу лиофилизације". хттп://ввв.лабцонцо.цом/невс/топ-5-лиопхилизатион-мистакес