Мерење кинетике ензима
Као мало позадине, ензими су протеини који делују као катализатори у смањивању количине енергије активације за реакцију. Енергија активације је енергија која је потребна да се реакције "започну" јер се многе реакције не појављују врло брзо (или се уопште јављају) ако су термодинамски могуће.
Ензими катализују специфичне реакције на одређеној локацији (познате као активно место) где се реактанти везују и реагују на стварање производа. Подлоге имају активне сајтове који су специфични само за њих, тако да ниједна друга супстанца не веже или не реагује на истој локацији. Као брава и кључ, сваки ензим ће катализовати само једну специфичну реакцију (уз изузетке).
Специфична активност се користи у методама изолације протеина како би се назначио проценат пречишћавања. Важно је знати ову јединицу када купујете ензиме како бисте прецизно показали колико чисте ензиме добијате.
Приликом мерења кинетике ензима (брзина реакције ензима са супстратом - или површином), специфична активност је дефинирана као количина субстрата који ензим конвертује (реакције катализоване), по мг протеина у ензимском препарату, по јединици времена.
Пример специфичне активности био би:
- Специфична активност изолованог ензима измерена је на 150 умол / мин / мг протеина пре пречишћавања и 800 умола / мин / мг, после пречишћавања.
Специфична активност је важна мера чистоће ензима. Различите серије чистог ензима требале би имати исте вриједности и чак разређивање ензимског рјешења много пута ће имати идентичне специфичне вриједности активности иако ће бити различитих вриједности ензимске активности. То је зато што се у израчунавању специфичне активности бројчаника (јединице / мл) и именитељ (мг / мл) подједнако погађају.
Специфична активност је веома различита од активности, али израчунавање специфичне активности и даље зависи од вредности активности. То значи да ће наведена специфична вредност активности зависити од дефиниције ензимске јединице.
Комади ензима који имају нижу од очекиване специфичне вриједности активности могу садржати ензимске молекуле који су постали измењени или мјешани са нечистоћама.
Фактори који утичу на активност ензима
Могуће је да један ензим може имати различите измерене вредности активности када се мери у различитим лабораторијама (то јест, стварне разлике у мереној активности, а не очигледне разлике узроковане коришћењем различитих дефиниција јединице).
На који начин се врши тестирање (метод тестирања за одређивање чистоће ензима) утиче на вредности пријављених активности. На пример, ензими су углавном активнији између температура од 37 степени Целзијуса у поређењу са 20 степени Целзијуса, тако да ако се тест изведе на 21 степени Целзијуса, вредности ће се разликовати од испитивања изведених на температури од 32 степени Целзијуса , испитивања се изводе на температури између 20-37 степени Целзијуса).
Према томе, дефиниција ензимске јединице би се боље изразила као 1 јединица (У) количина ензима која катализује реакцију 1 нмол субстрата у минути у стандардним условима.